奧林巴斯倒置顯微鏡CKX53在細胞生長的應(yīng)用

本文摘自奧林巴斯顯微鏡官——

以下為原文：

自體軟骨細胞培養(yǎng)細胞生長特性的高效分析

-匯合檢查軟件在細胞處理中的應(yīng)用-

奧林巴斯倒置顯微鏡CKX53在細胞生長的應(yīng)用

背景

對自體軟骨細胞植入和新的再生藥物的開發(fā)具有重要意義的兩個因素是一個穩(wěn)定的細胞培養(yǎng)過程和有效的細胞生長特性分析。這兩個因素都有相關(guān)的挑戰(zhàn)。實現(xiàn)一個穩(wěn)定的培養(yǎng)過程需要準(zhǔn)確、可重復(fù)的細胞匯合信息來預(yù)測細胞傳代的最佳時間。對細胞生長特性的分析具有挑戰(zhàn)性，因為用戶希望獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，而不必培養(yǎng)大量的細胞。奧林巴斯介紹了CKX-CCSW軟件來改進細胞培養(yǎng)過程，幫助解決這些問題。

CKX-CCSW匯合檢測軟件

結(jié)合顯微鏡和數(shù)碼相機，該軟件可以測量活細胞的匯合度。一個快速，簡單的細胞計數(shù)程序和高度準(zhǔn)確和可重復(fù)的數(shù)據(jù)，使一致的，可預(yù)測的細胞培養(yǎng)在恒定的條件下。此外，可以測量培養(yǎng)的數(shù)量和密度，而不需要破壞培養(yǎng)，從而盡量減少污染的可能性。重要的細胞生長數(shù)據(jù)，如倍增時間(DT)和群體倍增水平(PDL)，是在不干擾細胞的情況下高效、無損地獲得的。

CKX 41顯微鏡、DP 27數(shù)碼相機和CKX-CCSW軟件.

CKX-CCSW匯合檢測軟件的效果

1.克服穩(wěn)定自體軟骨細胞培養(yǎng)過程的挑戰(zhàn)

細胞通道的時間通常取決于視覺評估，這會導(dǎo)致人為的錯誤和通道時間的變化。CKX-CCSW軟件提供了準(zhǔn)確的細胞在培養(yǎng)容器中生長的匯合信息，用戶可以在合適的時間通過細胞。

2.克服有效獲取細胞生長特性分析數(shù)據(jù)的挑戰(zhàn)

CKX-CCSW匯合檢查軟件提供了準(zhǔn)確、可重復(fù)的細胞生長數(shù)據(jù)，因此用戶可以在培養(yǎng)過程中計時細胞通道和使用較少的庫存。

準(zhǔn)確性驗證

為了評價CKX-CCSW軟件的性能，將軟件計算的細胞數(shù)與熒光染色圖像計算的細胞數(shù)進行比較。聚焦顯微鏡是獲得精確生長曲線的一個重要因素，該軟件的聚焦指示器產(chǎn)生了準(zhǔn)確的結(jié)果。該軟件的準(zhǔn)確度為84-111%，證明該軟件能建立可靠的細胞生長曲線。

利用CKX-CCSW技術(shù)，可以在低密度、高密度細胞培養(yǎng)狀態(tài)下，繪制出與熒光觀察結(jié)果相當(dāng)?shù)纳L曲線，而不受染色細胞的影響。

結(jié)語

將CKX 41顯微鏡、DP 27數(shù)碼顯微鏡攝像機和CKX-CCSW匯合檢測軟件結(jié)合在一起，使用戶能夠準(zhǔn)確地估計出細胞通過的適當(dāng)時間，同時將人為誤差降低。該軟件在不改變細胞培養(yǎng)室工作流程的情況下，可以方便地獲得準(zhǔn)確、可重復(fù)的細胞生長數(shù)據(jù)。

這項研究部分由日本醫(yī)學(xué)研究開發(fā)廳(AMED)和經(jīng)濟、貿(mào)易和工業(yè)部在其題為“開發(fā)再生醫(yī)學(xué)產(chǎn)業(yè)化基礎(chǔ)評估技術(shù)"的方案中批準(zhǔn)。樣品準(zhǔn)備和圖像數(shù)據(jù)由奧林巴斯-RMS公司提供。