人工體外受精細(xì)胞注射系統(tǒng)可詳細(xì)記錄每個卵子對應(yīng)的患者信息、注射時間、使用的精子編號及質(zhì)量特征、操作者姓名等;利用條形碼或電子芯片標(biāo)記培養(yǎng)皿,確保全程可追溯。若發(fā)現(xiàn)多精注射(罕見但可能發(fā)生),應(yīng)在原核形成前(受精后6–8小時)通過顯微吸除多余雄原核進行補救;對于反復(fù)注射失敗的案例,建議轉(zhuǎn)為常規(guī)IVF方案以避免資源浪費。
人工體外受精細(xì)胞注射系統(tǒng)的使用注意事項:
(一)樣本處理階段
1.精子優(yōu)化篩選:優(yōu)先選擇形態(tài)正常、活動力強的精子進行洗滌濃縮(常用密度梯度離心法去除精漿中的毒性物質(zhì));對于嚴(yán)重少弱畸精子癥患者,可采用離心結(jié)合上游法提高回收率。禁止使用死亡或凋亡精子,因其遺傳物質(zhì)易碎片化。
2.卵子質(zhì)量評估:僅選取處于MII期的成熟卵母細(xì)胞(第一極體明顯、胞質(zhì)均勻透亮),排除過熟(老化)或未成熟的卵子(前者染色體易異常,后者難以完成減數(shù)分裂)。脫顆粒細(xì)胞時要輕柔吹打,避免機械損傷透明帶。
3.無菌操作原則:所有器械需經(jīng)高壓滅菌或紫外線消毒;操作人員佩戴無菌手套、口罩及帽子,避免呼氣直接接觸培養(yǎng)皿;每例患者的耗材(如注射針、持卵管)均為一次性使用,防止交叉污染。
(二)顯微注射關(guān)鍵環(huán)節(jié)
1.“三快一準(zhǔn)”原則:快速定位目標(biāo)區(qū)域(將極體置于6點或12點鐘方向作為參照)、快速調(diào)整針尖角度、快速完成穿刺動作;準(zhǔn)確控制進針深度——僅刺入胞質(zhì)內(nèi)約1/3體積(避免觸及核區(qū)),確保精子頭部注入細(xì)胞質(zhì)且尾部留在外面(利于后續(xù)觀察受精標(biāo)志)。
2.損傷策略:盡量減少對卵周隙的擾動,避免觸碰到其他部位的胞膜;若注射失敗(如針尖偏移),應(yīng)更換新卵而非重復(fù)嘗試,以免累積損傷降低著床率。研究顯示,透明帶上超過3個穿刺孔會增加多精受精風(fēng)險。
3.實時動態(tài)監(jiān)測:注射過程中持續(xù)觀察細(xì)胞反應(yīng),正常情況下可見胞質(zhì)輕微回縮但迅速恢復(fù);若出現(xiàn)大量空泡化或胞質(zhì)外溢,提示操作過重,需立即終止并記錄該病例的特殊反應(yīng)。